108                                                   中华风湿病学杂志2004年2月第8卷第2期Chin J Rheumatol, February 2004, Vol 8, No.2

类风湿关节炎抗原的研究进展

李茹  栗占国

    类风湿关节炎( rheumatoid arthritis，RA)是一种抗原驱动及T细胞介导的全身性自身疫病。近年来，有关RA抗原的研究已取得不少进展。研究者采用不同方法相继发现了多种可能与RA发病相关的抗原，并通过试验证明，这些抗原在自身免疫反应的诱导、炎症的发生及发展等病理过程中发挥了重要作用。本文就主要的RA抗原的研究现状及其意义进行了讨论。

1 内源性抗原

1.1 关节来源的抗原

1.1.1 人软骨糖蛋白-39：人软骨糖蛋白（HCgp）-39也可称为YKL-40，该蛋白的氨基酸序列与哺乳动物壳多糖酶家族成员同源，但其本身无壳多糖酶活性。生理条件下可由软骨细胞，滑膜成纤维细胞、巨噬细胞及中性粒细胞产生，参与组织重建和细胞外基质的降解。研究显示，HCgp-39多肽可被RA患者的外周血单个核细胞（PBMC）识别，引起PBMC增生；并可诱导BALB/c鼠发生慢性侵袭性关节炎^[1]。试验证实HCgp-39在RA患者的关节软骨及滑膜高表达，可能通过在关节局部释放，作为自身抗原诱导T细胞激活，并促进组织重建或基质降解，从而参与RA的免疫病理过程。

    临床研究发展，RA患者血清中HCgp-39与白细胞介素（IL）-6、C反应蛋白（CRP）呈正相关。HCgp-39水平增高提示病情活动，关节病变程度较重^[2]。因此，HCgp-39可能是RA临床评价的有用指标。目前，可溶性HLA-DRB1*0401与HCgp-39肽段融合形成的复合体治疗RA已取得初步疗效。

1.1.2 II型胶原：II型胶原（CII）可刺激RA患者T细胞的回忆反应引起增生，并可诱导CII抗体的产生。大量动物试验证实，CII可诱发胶原性关节炎（CIA），出现与RA类似的病理表现。现已知CII与某些细菌或病菌（如结核分支杆菌、EB病毒等）的蛋白均存在共同表位QK/RRAA，可能通过分子模拟或模糊识别致病。这些研究提示，CII是诱导RA发病的主要自身抗原之一。近年来的不少研究显示，CII 261-273位氨基酸序列是CII的主要抗原表位，可能在激活T细胞引起自身免疫反应中发挥了主要作用^[3，4]。

1.1.3 聚合素：聚合素（aggrecan）是构成软骨基质的主要大分子蛋白多糖成分。RA患者聚合素降解加速，可能导致关节软骨的破坏。试验证实，聚合素可激活RA患者外周血T细胞诱导自身免疫反应。一般认为，聚合素诱导关节炎的主要T 细胞表位存在于该抗原的G1球状结构域。其中主要肽表位280-292位氨基酸除诱导T细胞扩增及干扰素（IFN）-γ分泌外，尚可诱导IgG2型抗体反应。早期RA患者滑液中存在聚合素降解产生的G1区肽段，提示聚合素可能参与RA自身免疫反应的诱导和维持^[5]。

1.1.4 P68：Blass等从滑膜总蛋白成分分离出一种与RA相关的糖蛋白成分P68。测序分析显示，P68实际是一种分子伴娘蛋白，也称免疫球蛋白结合蛋白（BiP）。除滑膜外，它也存在于多种组织、细胞的内质网和（或）胞质中。在B细胞内质网中，Bip与免疫球蛋白（Ig）重链结合，辅助Ig肽链折叠及向胞外分泌。实验证实P68可刺激RA患者外周血及滑液T细胞增生。病理条件下，P68异常表达于细胞核内，N-乙酰葡糖胺修饰的碳水化合物基团可能是抗P68抗体针对的主要抗原表位。Blass等^[6]认为，P68抗原的糖基化修饰结合非生理的抗原定位可能激发RA患者产生抗原特异性免疫反应，参与RA的病理过程。

        P68抗体对RA诊断敏感性为64%，特异性为99%，可见于RF阴性RA患者。因此，P68抗体可能为RA的血清标志之一。此外，BiP可抵制CIA及大鼠佐剂性关节炎的发生和发展，对RA的免疫抑制治疗提供了思路。

1.1.5 其他：P205、软骨连接蛋白（LP）、CH65、骨桥蛋白（osteopontin）等均可能做为关节局部的自身抗原参与RA免疫病理过程。目前，对于这些抗原在RA发病机制中作用的研究较少，结论尚不一致。

1.2 非关节来源的抗原

1.2.1 钙蛋白酶抑素：钙蛋白酶抑素（calpastatin）广泛存在于各种细胞内，细胞激活时也可表达与细胞外，是钙蛋白酶（calpain）的天然抑制剂，可抑制钙蛋白酶对细胞外基质等多种底物的降解破坏作用。在RA患者，炎症刺激软骨及滑膜成纤维细胞产生钙蛋白酶增多。同时，由于针对钙蛋白酶抑素的自身反应性T 细胞或自身抗体存在，使其对钙蛋白酶的抑制作用减弱。过度活化的钙蛋白酶导致软骨基质降解，最终引起关节破坏。

    钙蛋白酶抑素不同抗原结构域特异的自身抗体在RA患者中的阳性率为10%-45.5%，但因病例数尚少，其特异性有待进一步研究。其中，针对钙蛋白酶抑素C端27位氨基酸表位的抗体（ACAST-C27）可见于血清阴性的早期RA，可能对于RA的早期诊断有一定意义^[7]。

1.2.2 葡萄糖6-磷酸异构酸：葡萄糖6-磷酸异构酶（GPI）可见于各种细胞胞质内，是糖酵解和糖异生过程的重要酶类，并可作为一种细胞因子或生长因子分泌于细胞外，诱导髓样干细胞向单核细胞以及B细胞向成熟抗体分泌细胞的分化。RA患者滑液及血浆存在高滴度GPI抗体及可溶性GPI分子。GPI-抗GPI抗体免疫复合物可在患者滑膜表面、滑膜动脉及毛细血管内皮细胞壁沉积，并通过Fc受体介导或替代途径补体激活诱发关节炎症。此外，GPI还可能通过与滑膜血管内皮细胞表面受体结合，介导炎细胞向关节局部的迁移^[8]。这一假说可能提示了关节外抗原引起特异性关节病变的机制。

         Schaller等报道，GPI抗体可见于64%RA患者，明显高于正常对照（3%）。但近来有试验显示，RA、SS及SLE患者血清GPI抗体阳性率无差别，因此，有人认为，GPI可能非RA特异性抗原成分。这一抗原在RA发病机制中的作用及临床意义还有待进一步的研究。

1.2.3 聚丝蛋白：聚丝蛋白（filaggrin）生理情况下以前聚丝蛋白（profilaggrin）形式贮存于上皮角质细胞透明颗粒中，在细胞分化的终末阶段去磷酸化，水解产生聚丝蛋白分子。RA患者血清中可检出抗聚丝蛋白抗体（AFA），抗核周因子（APF）及抗角蛋白抗体（AKA）也可识别聚丝蛋白或其前体衍生物^[9]。

RA滑膜组织间质中脱亚氨基的纤维素α和β链与AFA存在交叉反应，并可能通过局部抗体产生免疫复合物形成导致关节炎症的进展。

    现已证明，聚丝蛋白第306-324位氨基酸（SHQESTRCRSRGRSGRSGS）中精氨酸（R）残基的瓜氨酸化提供了RA患者AFA识别的主要表位，其中心位置的瓜氨酸残基在RA对聚丝蛋白的识别过程至关重要^[10]。根据这一主要表位合成的环瓜氨酸短肽（CCP）的抗体检测已用于RA临床，敏感性及特异性较高，对RA早期诊断及病情预测十分有益。

1.3 其他

    目前，已经证明，HLA-DR1/4片段存在QK/RRAA共同表位，可能通过HLA-DQ分子提呈给T细胞诱导自身免疫。其他抗原，如gp130、A2hnRNP、变性IgG、卵泡抑素相关蛋白（FRP）、Sa抗原等均可能与RA发生或病情活动有关。

2 外源性抗原

    各种主要抗原的来源、致病机制及与临床的关系见表1，但目前尚无足够证据表明这些抗原是导致RA的活动因素。

表1  RA抗原的来源、致病机制及与临床的关系

2.1 细菌及病毒：RA不是感染性关节炎，但感染可能做为诱因引起RA发病。目前已发现奇异变形杆菌、大肠杆菌、结核分支杆菌等可能与RA与关。除上述细菌外，细小病毒B19的衣壳蛋白VP-1高表达于活动性RA的滑膜^[11]，B19急性感染常可引起类似RA的多关节炎发生，部分患者可展成RA。因此认为，B19可能参与RA的发病机制。此外，逆转录病毒，如HVR-5、HERV-K等，可能通过上调原癌基因的表达，增加生长因子及基质降解酶的产生，参与RA关节破坏的进展。其他病毒，如EB病毒、巨细胞病毒等在RA滑膜中检出率较高。这些病毒对于RA有无原发致病性尚需研究。

2.2 超抗原：RA患者血清中存在某些TCR-Vβ基因表达的偏倚，如Howell等^[12]证明，TCR-Vβ3、4、17表达增加，提示可能有超值抗原存在，并多克隆激活T细胞。目前已知，关节炎支原体丝裂原（MAM）可通过与人TCR-Vβ17片段结合而发挥超抗原作用，RA患者血清中MAM抗体水平明显增高，提示MAM及MAM样分子可能与RA病理机制有关^[13]。

    综上所述，RA的抗原研究结果可概括为如下几点：①可能有多种自身抗原参与RA致病。②不同患者的抗原或自身抗原可能不同。③某一种始动抗原诱导RA患者T细胞激活后，可能通过分子模拟识别机制引起针对自身抗原的自身免疫反应。即便始动抗原消失，针对序列相同或类似的自身抗原的免疫反应仍然持续，并引起RA的病变进展。进一步研究这些抗原在RA诱导阶段与HLA及TCR等分子的作用机制是RA研究中的关键，并可能由此对本病的诊断及免疫治疗产生重要影响。

参考文献（略）